关于过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞活化、凋亡、分泌功能测定由润生堂五世中医诊所为大家来详细的介绍一下，希望大家能够更多的了解过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞活化、凋亡、分泌功能测定。

2.2 IL-2、IL-4水平 HSP患儿IL-2水平较健康儿童明显下降（P=0.0056），HSP患儿地塞米松组IL-2水平较空白对照组稍有下降，但差异无显著性（P=0.56）;HSP患儿IL-4水平较健康儿童明显升高（P=0.00023），HSP患儿地塞米松组IL-4水平较空白对照组明显下

2.1 CD 3 CD 25 表达量 HSP患儿PBMC中CD 3 CD 25 表达量较健康儿童明显升高（P=0.011），而HSP患儿地塞米松组与空白对照组比较CD 3 CD 25 表达量明显降低（P=0.024）。见图1、图2。

见表1。

2 实验结果

1.2.5 统计学处理 所有数据均以X±s表示，用Excel统计软件对结果进行t检验及线性回归分析，P0.05为统计学差异有显著性。

1.2.4 淋巴细胞分泌的IL-2、IL-4水平的检测 （1）用RPMI-1640完全培养液调细胞数达1×10 6 /ml，分组同上，加入24孔培养板上，置37℃、5%CO 2 加湿孵箱中培养72h。（2）收取培养的细胞悬液于EP管中，以8000r/min离心5min，收集上清液置-70℃冰箱中冻存待检;用EILSA法检测IL-2、IL-4含量。（按华美公司ELISA试剂盒上的操作说明书进行操作）。

1.2.3 淋巴细胞CD 3 CD 25 抗原的检测 （1）取RPMI-1640完全培养液调细胞数达1×10 6 /ml，分2组，分组方法同上。置24孔培养板中于37℃、5%CO 2 加湿孵箱中培养72h。 （2）每组中分别加入CD 3 单抗（鼠抗人CD 3 -IgG/FITC，购自IQ公司）15μl、CD 25 单抗（鼠抗人CD 25 -IgG/PE，购自IQ公司）15μl，37℃孵育30min;收取细胞后用PBS液1500r/min离心5min，洗涤2次;加PBS液1ml重悬细胞送流式细胞仪检测CD 3 CD 25 表达量。

1.2.2 淋巴细胞凋亡的检测 （1）细胞培养:用RPMI-1640完全培养液调细胞数达1×10 6/ml，分设2组:地塞米松组:地塞米松100μl+1ml细胞悬液;空白对照组:1ml细胞悬液+RPMI-1640完全培养液100μl。使每组地塞米松终浓度为1×10 -5 mol/L，加24孔培养板上置37℃、5%CO 2 加湿孵箱中培养72h。（2）将以上2组培养的细胞悬液1500r/min离心5min收取细胞，PBS液2ml洗涤2次后用75%乙醇固定，置-20℃冰箱冻存12h以上。（3）将乙醇固定的细胞悬液1500r/min离心5min收取细胞，再用PBS液洗涤2次，然后用1ml PI工作液将细胞重悬，4℃避光孵育30min。（4）流式细胞仪分析:凋亡细胞在流式细胞仪（美国Calibur公司）检测DNA直方图上呈现特征性的二倍体峰，按500～600cells/s计数1×10 4 个细胞。根据二倍体及亚二倍体峰，用Modfit LT-Unititle分析软件分析细胞凋亡率（APO）。

1.2.1 密度梯度离心法制备单个核细胞，用RPMI-1640完全培养液调备细胞悬液;0.4%台盼兰排除计数，活细胞数95%。

1.2 实验方法及步骤

1.1 研究对象 HSP组患儿16例（均来自于徐州医学院附属医院儿科），其中男9例，女7例，平均年龄为7.5岁，均符合《实用儿科学》（第6版）诊断标准，且近一个月未用过地塞米松等免疫抑制剂（临床一般资料见表1）。另外选择20例健康同龄儿童（采血前健康，无服用糖皮质激素等免疫抑制剂史）作为正常对照组。并且分别在每组内分设两组，一组为地塞米松组，另一组为空白对照组。